产品介绍

本产品采用独特的裂解反应体系，能够快速的从多糖多酚含量高的植物种子样本(如：香蕉、棉花等)中释放出基因组DNA，用于PCR反应，因此特别适合大规模基因检测。为了满足不同检测试验的需要，本试剂盒可以使用多种类型的样本(如完整种子、微量组织切块或多颗种子的磨碎样本)进行实验。其中，对于还需要进行萌发的种子样本，可以选择切取种胚以外的微量组织切块(1-5mg)进行实验；对于需要在大量样本中进行抽样检测的实验，可以选择将多个样本混合并磨碎成直径0.5mm左右的颗粒后再进行实验(最低可以检测出0.1%的目的样本)。

裂解反应体系释放基因组DNA过程可以在5-10min内完成，不需要其他去蛋白、RNA或者次生代谢产物的过程，即可将释放出的微量DNA作为模板进行PCR反应。

2× Seed PCR Easy^TM Mix具有很强的PCR反应抑制物耐受性，能直接以植物材料的裂解混合液为模板，进行高效特异性扩增。该试剂包含公司专门针对直接PCR改造的D-Taq DNA Polymerase、dNTPs、MgCl₂、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂和稳定剂。与裂解反应体系配合使用能够快速简便地对样品进行检测，并具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点。

2× Seed PCR Easy^TM Mix(UNG)在2× Seed PCR Easy^TM Mix的基础上用dUTP替代了dTTP，并同时加入能够降解含有dUTP模板的UNG酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR反应前，利用UNG酶降解含有尿嘧啶的PCR产物，UNG酶对不含有尿嘧啶的模板不会造成任何影响，从而保证扩增的特异性和准确性，防止了大规模基因检测时可能出现的PCR产物污染问题。

D-Taq DNA polymerase是Foregene为直接PCR反应专门研制出的DNA polymerase。D-Taq DNA polymerase对多种PCR反应抑制剂具有极强的的耐受性、在各种复杂反应体系中均能高效扩增痕量的DNA，扩增速度可达2Kb/min，特别适合进行直接PCR反应。

根据植物样本差异，该产品分为两个大类：植物种子直接PCR试剂盒(Plant Seed Direct PCR Kit)和多糖多酚植物种子直接PCR试剂盒(Plant Seed Direct PCR Plus Kit)。在裂解阶段，考虑到不同类型的种子或组织材料在裂解过程中试剂用量差异较大，客户可根据自己实验材料的大小选择相应的植物种子(中小型)直接PCR试剂盒或植物种子(大型)直接PCR试剂盒；在PCR检测阶段，客户也可以根据实验需求，选用普通的2× Seed PCR Easy^TM Mix或是具有防PCR扩增产物污染作用的2× SeedPCR Easy^TM Mix(UNG)。

试剂盒应用

适用范围：多种多糖多酚植物种子。

样本裂解释放的DNA：仅用作PCR模板。

试剂盒可用于以下用途：转基因种子鉴定、植物基因分型等。

试剂盒局限性

扩增片段≤1kb；超过1kb，扩增效率下降或者扩增失败。

PCR产物可能会有点突变，如用于基因克隆，请知悉。

UNG防PCR产物污染体系得到的PCR产物请勿用于基因克隆或测序。

PCR产物3’末端随机加A尾。

试剂盒内容

Buffer SSP1：提供多糖多酚植物种子裂解反应所需的环境。

Buffer SSP2：补充提供多糖多酚植物种子裂解反应所需的环境。

Buffer SP2：中和裂解产物，使其不影响后续PCR反应。

2× Seed PCR Easy^TM Mix(UNG)：在2× Leaf PCR Easy^TM Mix的基础上用dUTP替代了dTTP，并同时加入能够降解含有dUTP模板的UNG酶，从而能够有效防止PCR扩增产物污染。包含福际生物特别改造的D-Taq DNA Polymerase、UDG、dNTPs、MgCl₂、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂以及稳定剂等。PCR反应时，只需将适当的裂解混合液、引物、ddH₂O添加到2×Seed PCR Easy^TM Mix(UNG)中即可用于PCR反应。

6× DNA Loading Buffer：该Loading Buffer中不含有SDS。建议在进行琼脂糖凝胶电泳时，配搭使用试剂盒附赠的6× DNA Loading Buffer，以便取得好的电泳结果。切勿使用含有SDS的Loading Buffer，否则在电泳时会在泳道中有一大团拖尾亮光，影响实验结果。

储存条件

全程低温冰盒运输，保证试剂盒Part I、Part II处于＜4℃状态。

本试剂盒Part I保存在2-8℃。

v 试剂Buffer SP1、Buffer SP2、6× DNA Loading Buffer在干燥条件下，可保存12个月；如需保存更长时间可置于2–8℃。

本试剂盒Part II保存在-20℃。

v  试剂2× Seed PCR Easy^TM Mix(UNG)，在-20℃条件下可保存12个月；若频繁使用，也可置于4℃短期保存(限10天内用完)。

操作流程